7种细胞增殖情况检测方法

Brdu检测法：5-溴脱氧尿嘧啶核苷（Brdu）代替胸腺嘧啶合成DNA，由于Brdu上携带了专一性抗体可通过免疫荧光、流式细胞术检测出来，由此即可得出合成DNA的量。

EdU 和 BrdU

3.MTT检测法

说到MTT检测法，很多人可能会疑问MTT是个啥，其实MTT长这样子（见下图），分子式C18H16N5SBr，中文名为噻唑蓝。

在MTT检测中，细胞是死是活主要看线粒体内的脱氢酶有没活性，那怎么知道他有没活性？这时蓝姑娘就牺牲自己，为脱氢酶验明正身。如果线粒体内的脱氢酶有活性，他就能将黄色的蓝姑娘（MTT）分解成兰紫色的水不溶性的甲瓒，并沉积在细胞中，死细胞无此功能。然后二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数和细胞活力成正比。

4.3H-TdR渗入法 
胸腺嘧啶核苷（TdR）是DNA特有的碱基，也是DNA合成的必需物质。用同位素3H标记TdR即3H-TdR作为DNA合成的前体能掺入DNA合成代谢过程，那之后的每一条新合成的DNA双链像被安装了GPS定位器一样，都能被液体闪烁计数器检测到，通过测定细胞的放射性强度，可以反映细胞DNA的代谢及细胞增殖情况。优点：3H-TdR掺入法敏感性高，客观性强，重复性好。缺点：需一定设备条件：液体闪烁计数器，这玩意不便宜，同时还存在放射性核素污染问题，真是伤钱包又伤身体。

5.CCK-8检测法

CCK-8就是MTT的升级版， CCK-8细胞活性检测试剂中含有WST-8——一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以为线粒体内的脱氢酶验明正身，在脱氢酶作用下，还原生成橙黄色的甲瓒产物。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。

6.核抗原Ki‐67染色法 
Ki-67染色，研究人员可以评估处于细胞周期所有活跃期的总增殖细胞的百分比。科研人员可以借此观察药物或未知化合物的刺激效应或抗增殖效应。可用免疫组织化学技术或流式细胞术检测。

7.CFSE检测法

羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）是一种可穿透细胞膜的荧光染料，可以不可逆地与细胞内的氨基结合偶联到细胞蛋白质上，是一种良好的细胞标记物。

其检测法原理：CFSE进入细胞后，可以不可逆地与细胞内的氨基结合偶联到细胞蛋白质上。当细胞分裂时，CFSE标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，因此其荧光强度是亲代细胞的一。在一个增殖的细胞群中，各连续代细胞的荧光强度呈对递减，利用流式细胞仪在488nm激发光和荧光检测通道可对其进行分析。

以上就是一些细胞增殖情况检测的方法，至于如何选用则需要根据你的细胞类型和研究方案做选择。如已有待测细胞希望了解细胞增殖中的代谢活性变化，可以使用四唑盐和比色法检测；对DNA合成的改变更感兴趣，可以选择用BrdU标记，再通过比色法、化学发光或荧光检测进行分析；如研究对象是单个细胞，也可以用BrdU标记来检测DNA合成，将其与荧光标记的相应抗体结合，然后通过流式细胞仪来进行流式分选。